移液槍是實驗操作上的常用工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現性好,那就要注意正確移液槍使用。
1. 影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差
(2)氣密性:tip和槍體的結合部,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差
(3)吸速:容易造成tip內氣泡產生,而且會污染槍頭
(4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產生誤差。解決辦法:反復抽吸4-5次就可改善。
2. 移液器具體使用方法
更換tip法:
(1)調節(jié)旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差。
(2)插上tip:無菌操作時,要注意動作迅速正確,不能用手碰tip,動作的力度要保持一致,禁止廢動作。普通操作時,可用拇指食指上緊,但手不能碰tip頭處。
(3)指壓到第一段,tip頭接觸試劑。白色tip進到液面1 mm一下,黃色tip 2-3 mm,藍色tip2-4 mm,避免液壓的影響造成的誤差。
(4)緩慢吸試劑,禁止速度過快,液體進入槍頭。
(5)移出tip后,先在容器內壁輕輕靠住,使tip外壁液體流下。
(6)將tip貼在目標容器內壁,輕輕按到第一段,壓出液體。
(7)tip 頭在容器內壁略上滑動,保留頂部少量液體,移出目標容器,手指卸掉 tip,注意不要使試劑濺出。
一只tip分注法:不適用于揮發(fā)性,有毒性試劑。
(1)同上述(1)-(4),移出液面后,先緩慢按到第一段,在用力按到第二段,將試劑全壓出。
(2)同上述(3),緩慢吸出液體。
(3)在目標容器液體上空,壓出試劑到第二段,注意壓的力度要和A相同,還應注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段,可重復上述操作。達到目標容器原有液體不污染tip的目的。
轉移數ul的貴重試劑時的方法:
(1)同上述(1)-(4),移出液面后,在容器內壁輕按幾下,使外壁液體流下。白色tip進到液面1 mm以下,這最重要。
(2)tip頭浸入目標容器的液面下,緩慢壓到第一段。
(3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,反復4-5次,,洗凈tip內壁液體。
(4)將tip 頭移出液面,在內壁輕輕靠住,壓出液體到第二段。
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